Progetti di ricerca

Progetto TMA

la famiglia chimica delle furocumarine: modellistica molecolare per nuovi farmaci anti-infiammatori

aggiornamento Aprile 2023

La correzione della proteina CFTR mutata è l’obiettivo prioritario del trattamento della patologia polmonare dei pazienti affetti da fibrosi cistica. La possibilità che “correttori” e “potenziatori” della CFTR mutata siano in grado di curare contemporaneamente anche la componente infiammatoria cronica polmonare non è confermata e suggerisce la necessità di progettare nuovi farmaci antinfiammatori disegnati ad hoc per la specifica patologia polmonare.

Ha quindi sollevato notevole interesse l’azione multipla della 4,6,4’-trimetilangelicina (TMA), furocumarina a geometria di condensazione angolare, nota per essere un modulatore della proteina CFTR, con triplice attività di correzione, di potenziamento e antinfiammatoria (Tamanini et al, 2011; Marzaro et al, 2013; Favia et al, 2014; Lampronti et al, 2017).

TMA è stata ottenuta da uno screening di piante medicinali della tradizione del Bangladesh, che ha identificato inizialmente il capostipite furocumarinico lineare 5-metossipsoralene (5-MOP) (BOX 1) e successivamente l’analogo angolare TMA (BOX 2).

Durante le fasi iniziali dello studio, alcuni derivati hanno dimostrato di agire come antinfiammatori inibendo l’interazione NF-kB/DNA con il promotore di IL-8/CXCL8, anche a minori concentrazioni rispetto alla TMA di riferimento, e di diminuire in cellule fibrocistiche, come la TMA, l’espressione di IL-8/CXCL8, citochina chemiotattica per i neutrofili, marcatore caratteristico della patologia infettivo-infiammatoria tipica del polmone dei pazienti CF.

L’indagine sulle proprietà di TMA è stata poi estesa ad altre potenziali azioni su CFTR mutata, testando i possibili effetti sulla correzione e potenziamento della proteina con la più comune mutazione F508del CFTR (BOX 3).

Alcuni di questi derivati hanno mantenuto anche le attività di modulazione di CFTR, ripristinando la funzione in cellule FRT-YFP-F508del, HEK-293 e bronco-epiteliali CF e dimostrando di mediare la correzione attraverso modifica di MSD1 e stabilizzazione indiretta dell’interfaccia tra NBD1 e CL4 (Laselva et al, 2016; Laselva et al, 2018a) (BOX 4).

La possibilità di procedere con lo sviluppo industriale farmaceutico di TMA mediante brevettazione internazionale e designazione come Farmaco Orfano della European Medicines Agency è stata valutata grazie a Marco Prosdocimi ed i colleghi Germano Carganico, Fabrizio Minoja e Anita Falezza (Rare Partners, Milano) giungendo alla conclusione che era necessario disegnare nuovi analoghi di TMA ad elevato profilo di sicurezza.  Di conseguenza, studi di SAR (relazioni struttura-attività) condotti dal gruppo di Adriana Chilin (UNIPD) hanno permesso di progettare, sintetizzare e selezionare analoghi di TMA completamente privi degli effetti mutageni e fototossici rilevati nella TMA capostipite 4,6,4′-trimetilangelicina, da studiare come possibili correttori e potenziatori di CFTR mutata, nonché come antinfiammatori di nuova generazione, in collaborazione con il gruppo guidato da Ilaria Lampronti (UNIFE) su progetti finanziati dalla Fondazione Italiana per la Ricerca sulla Fibrosi Cistica (BOX 5).

La interazione degli analoghi della TMA con il legame di NF-kB con il sito di consenso nel promotore della chemochina neutrofilica IL-8 (Tamanini et al. 2011; Lampronti et al. 2017) ha indotto una serie di verifiche ulteriori dell’effetto anti-infiammatorio. Analoghi di TMA sono stati sintetizzati dal gruppo collaborativo guidato da Adriana Chilin, portando ad identificare analoghi di TMA privi di fotoreattività, mutagenicitò e tossicità verificata con test in vitro (cfr Vaccarin et al Int J Mol Sci 2022) e a sviluppare da parte dello stesso gruppo formulazioni che implementano la biodisponibilità dopo somministrazione orale in modello murino di questi composti altamente lipofili (cfr Franceschinis et al Pharmaceutics 2022). La libreria di composti selezionata per gli aspetti di sicurezza è quindi stata sottoposta a screening sulla efficacia dell’effetto anti-infiammatorio in modelli sperimentali in vitro ed in modello murino in vivo portando ad identificare l’analogo GY971a come una molecola attiva nel ridurre l’eccessivo richiamo di leucociti neutrofili tipico della patologia polmonare della fibrosi cistica (cfr Tupini at al Int J Mol Sci 2022). Ulteriori studi sono in corso per consolidare i primi risultati ottenuti.

Referenze bibliografiche

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